Бактериологический метод исследования предусматривает выделение возбудителя заболевания путем посева на плотные питательные среды, выделение чистой культуры и идентификацию возбудителей рода бордетелла до вида.
Посев материала выполняется посевной Системой PREVI Isola. Высокоточная технология позволяет стандартизовать посев и повысить качество результата.
Идентификация микроорганизмов осуществляется на молекулярном уровне с помощью прибора масс-спектрометр Vitek-MS. Идентификация происходит по рибосомальным белкам, которые являются уникальными маркерами каждого микроорганизма. Биоинформационное программное обеспечение сопоставляет получаемые результаты с обширной базой данных, обеспечивает надежную и точную идентификацию.
Биоматериал, используемый для исследования:
1) слизь с задней стенки глотки, осаждающаяся при кашле
2) слизь из носоглотки
Правила отбора: до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности - непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;
забор производят натощак или через 2-3 ч после приема пищи.
Забор материала с задней стенки глотки заднеглоточным тампоном рекомендуется производить двумя тампонами.
Медицинский работник левой рукой фиксирует с помощью шпателя корень языка, а правой вводит каждый тампон в полость рта, продвигая его за корень языка. Тампон не должен касаться слизистой щек, языка и миндалин. Кончиком тампона и выпуклой его частью касаются задней стенки глотки, проводя по ней справа налево 2 - 3 раза. Затем также осторожно, над шпателем, извлекают тампон из полости рта.
Если ребенок проявляет признаки беспокойства, то стоящий за его спиной помощник сзади фиксирует голову.
Материал с первого тампона сразу засевают на 2 чашки Петри с питательной средой. Второй тампон помещают в пробирку с транспортной средой.
Забор материала с задней стенки глотки "кашлевыми пластинками". Сбор материала производят на 2 чашки с питательной средой. Во время приступа кашля левой рукой снимают крышку чашки, а правой подносят ее ко рту на расстоянии 10 - 12 см так, чтобы капельки слизи из дыхательных путей попали на поверхность среды. Чашку в таком положении держат некоторое время (в течение 6 - 8 кашлевых толчков). При непродолжительном покашливании можно эту чашку поднести повторно. На питательную среду не должны попадать слюна, рвотные массы, мокрота. Затем чашку с питательной средой закрывают крышкой и доставляют в лабораторию.
Забор слизи из носоглотки отбирают носоглоточным тампоном или путем аспирации. Взятие может производиться только специально обученным персоналом.
Мазки со слизистой носоглотки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2 - 3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3 - 4 см для детей и 5 - 6 см для взрослых).
Хранение и транспортировка: при транспортировании следует оберегать материал от прямых солнечных лучей, сохраняя его при температуре 35 - 37 °C. Доставка должна занимать не более 2 - 4 ч; в транспортной среде материал может храниться при комнатной температуре до 72 часов.
Лабораторные исследования проводят с диагностической целью и по эпидемическим показаниям:
1) С диагностической целью:
детям, кашляющим в течение 7 дней и более, независимо от указаний на контакт с больным коклюшем;
детям с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания по клиническим данным;
взрослым с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания, работающим в родильных домах, детских больницах, санаториях, детских образовательных учреждениях и школах, в т.ч. закрытого типа;
исследование следует проводить двукратно ежедневно или через день в ранние сроки заболевания (не позднее 3-й недели болезни). В более поздние сроки высеваемость резко снижается.
2) По эпидемическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больным): детям, посещающим детские образовательные учреждения, находящимся в детских больницах, санаториях, в которых были выявлены больные коклюшем/паракоклюшем, а также всем детям до 14 лет, общавшимся с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях;взрослым, работающим в указанных выше детских учреждениях, при выявлении в них больных коклюшем/паракоклюшем, а также при общении с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях.